Produkty

DB Biotech – protilátky na troch úrovniach kvality.

DB Biotech môže vyvinúť a vyprodukovať protilátky voči každému proteínu so známou aminokyselinovou sekvenciou, mutáciou vo vzťahu k nejakej chorobe alebo posttranslačnej modifikácii. Proteín, voči ktorému má byť protilátka produkovaná je analyzovaný z troch aspektov. Najprv sa identifikuje parciálna primárna sekvencia v molekule proteínu, ktorá formuje epitop pre interakciu s protilátkou. Táto sekvencia je ďalej analyzovaná z hľadiska možnosti jej účasti na väzbových doménach proteínu, ako miesta dôležitých regulačných posttranslačných modifikácii alebo ako oblasti potenciálneho štiepenia proteolytickými enzýmami. Ak vytypovaný peptid po dôkladnej analýze vyhovuje ako imunogén, kontroluje sa jeho poloha v rámci terciárnej štruktúry proteínu kvôli jeho prístupnosti, teda rozpoznaní konkrétneho epitopu protilátkou na povrchu molekuly v rôznych momentoch jeho signálnych dráh.

Ak sa protilátkou mapuje konkrétna posttranslačná modifikácia, peptidová sekvencia okolo sledovanej modifikácie musí zodpovedať tiež hore uvedeným kritériám. Králik je imunizovaný syntetizovaným peptidom konjugovaným s nosným proteínom.

Tri stupne čistoty protilátky rôznej kvality sú vyrábane zo surového antiséra:

1) Imunoafinitne purifikované specifické imunoglobulíny, vhodné vo väčšine prípadov pre western blot, imunohistochémiu a ELISA.
2) Aplikáciou in vitro klónovacej technológie sa pripravujú čiste klóny protilátok, z ktorých každý jeden zodpovedá jednému klónu B lymfocytov. Tento stupeň čistoty imunoglobulínu zaručuje tú najvyššiu špecificitu, aviditu a afinitu. Naviac, špecifická aktivita klónu je najvyššia akú je možné dosiahnuť. Niekoľko nanogramov imunoglobulínov tejto kvality zaručuje špecifickú kvantitatívnu alebo semikvantitatívnu reakciu v rámci ELISA alebo inej diagnostickej metódy založenej na interakcii antigénu s protilátkou.
3) Klonálna protilátka môže byť použitá po príslušnej humanizácii pre účely humánnej aplikácie- vývoja humánneho lieku. Táto možnosť je limitovaná presným a špecifickým miestom na molekule proteínu ktoré súvisí s danou patológiou ochorenia, s prístupnosťou formovaného epitopu a možnosťou prípravy účinnej klonálnej protilátky voči nemu.

DB Biotech postupuje novým spôsobom pri vývoji protilátky aj pri komunikácii s klientom. V prvom rade naša firma konzultuje s klientom použitie dizajnovanej protilátky. Proteín voči ktorému má byť protilátka produkovaná je dôkladne analyzovaný z hľadiska vyšších štruktúr a ďalších aspektov proteomickej analýzy. Dizajnovaný peptid je použitý na produkciu polyklonálnej anti-peptidovej protilátky. Výsledný preparát najvyššej možnej čistoty, klón čistej imunoglobulínovej frakcie je pripravený zo surového antiséra pomocou novej originálnej technológie.

Tu uvádzame niekoľko príkladov proteínov voči ktorým sme pripravili klonálne protilátky:

• aktín
• p53
• iNOS
• γ-Interferon
• Izoformy Proteín Kinázy C (PKC):
• PKC-α
• PKC-βI
• PKC-βII
• PKC-γ
• PKC-δ
• PKC-ε
• PKC-ζ

Každá klonálna protilátka je analyzovaná z hľadiska jej afinity, špecificity a detailné údaje o možnosti jej použitia sú uvedené v časti Aplikačné Dáta, kde sú všetky potrebné informácie pre použitie pri western blote, imunohistochémii, ELISA a imunoprecipitácii.